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<!DOCTYPE html>

<title>CAG-Promotor</title>

</head>

<h1 id="firstHeading" class="firstHeading mw-first-heading"><span class="mw-page-title-main">CAG-Promotor</span></h1>

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</div>

<div id="mw-content-text" class="mw-body-content mw-content-ltr" lang="de" dir="ltr"><div class="mw-content-ltr mw-parser-output" lang="de" dir="ltr"><p>Der <b>CAG-Promotor</b> ist ein synthetisch erzeugtes <a href="Desoxyribonukleins%C3%A4ure" title="Desoxyribonukleinsäure">DNA</a>-Fragment, das in der <a href="Molekularbiologie" title="Molekularbiologie">Molekularbiologie</a>, <a href="Biochemie" title="Biochemie">Biochemie</a>, und <a href="Biotechnologie" title="Biotechnologie">Biotechnologie</a> als Werkzeug bei der Erzeugung <a href="Rekombinantes_Protein" title="Rekombinantes Protein">rekombinanter Proteine</a> eingesetzt wird.

</p>

<div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="Eigenschaften">Eigenschaften</h2></div>

<p>Der CAG-<a href="Promotor_(Genetik)" title="Promotor (Genetik)">Promotor</a> dient dem Erreichen einer hohen <a href="Konstitutive_Genexpression" class="mw-redirect" title="Konstitutive Genexpression">konstitutiven</a> <a href="Genexpression" title="Genexpression">Genexpression</a> in <a href="Eukaryotische_Zelle" class="mw-redirect" title="Eukaryotische Zelle">eukaryotischen Zellen</a> und somit der <a href="Protein%C3%BCberexpression" class="mw-redirect" title="Proteinüberexpression">Überexpression</a> rekombinanter Proteine. Der CAG-Promotor wurde im Labor von Yamamura Ken-ichi konstruiert.<sup id="cite_ref-DOI10.1016/0378-1119(89)90209-6_1-0" class="reference"><a href="#cite_note-DOI10.1016/0378-1119(89)90209-6-1"><span class="cite-bracket">[</span>1<span class="cite-bracket">]</span></a></sup> Er besteht aus:

</p>

<ul><li><b>C</b>, dem <a href="Humanes_Cytomegalievirus" title="Humanes Cytomegalievirus">Humanen Cytomegalievirus</a> (HCMV) <i>early</i> <a href="Enhancer_(Genetik)" title="Enhancer (Genetik)">Enhancerelement</a></li>

<li><b>A</b>, dem <a href="Promotor_(Genetik)" title="Promotor (Genetik)">Promotor</a>, dem ersten nicht translatierten <a href="Exon" title="Exon">Exon</a> und dem <a href="5'-Sequenz" class="mw-redirect" title="5'-Sequenz">5'</a>-Teil des ersten <a href="Intron" title="Intron">Introns</a> des <a href="Aktin" title="Aktin">beta-Aktin</a> Gens von Hühnern,</li>

<li><b>G</b>, dem <a href="3'-Sequenz" class="mw-redirect" title="3'-Sequenz">3'</a>-Teil des zweiten Introns und dem 5'-Teil des dritten Exons des <a href="Beta-Globin" class="mw-redirect" title="Beta-Globin">beta-Globin</a>-Gens von Kaninchen.</li></ul>

<p>Der CMV-Enhancer ist Bestandteil vieler eukaryotischer Expressionplasmide. Das Intron des Aktin-Gens weist ebenfalls eine Enhanceraktivität auf. Zudem erhöhen Introns in eukaryotischen Vektoren die Genexpression.<sup id="cite_ref-PMID3185553_2-0" class="reference"><a href="#cite_note-PMID3185553-2"><span class="cite-bracket">[</span>2<span class="cite-bracket">]</span></a></sup> Der Abschnitt aus dem beta-Globin Gen enthält eine für das <a href="Splei%C3%9Fen_(Biologie)" title="Spleißen (Biologie)">Spleißen</a> wichtige <i>branch point sequence</i> und ein Spliceakzeptorsequenz <i>(3'-splice site)</i>. Auch wenn das synthetische Element als CAG-Promotor bezeichnet wird, ist es im strengen Sinn ein 5'-aktivierendes Element, da es neben dem Promotor noch den CMV-Enhancer, Intron- und Exon-Sequenzen enthält.

</p><p>Die Verwendung des CAG-Promotors erlaubt auch eine hohe Expression in <a href="Gentechnisch_ver%C3%A4nderter_Organismus" title="Gentechnisch veränderter Organismus">transgenen Tieren</a> und in fast allen <a href="Zelltyp" title="Zelltyp">Zelltypen</a> von Säugern. So konnte in einer transgenen Mauslinie <a href="Gr%C3%BCn_fluoreszierendes_Protein" title="Grün fluoreszierendes Protein">GFP</a> mit Ausnahme der <a href="Erythrozyt" title="Erythrozyt">Erythrozyten</a> und der Haare in allen Geweben nachgewiesen werden.<sup id="cite_ref-PMID9175875_3-0" class="reference"><a href="#cite_note-PMID9175875-3"><span class="cite-bracket">[</span>3<span class="cite-bracket">]</span></a></sup> Beim Einsatz in embryonalen <a href="Stammzelle" title="Stammzelle">Stammzellen</a> hat der CAG-Promotor den Vorteil, dass es nicht zum Abschalten <a href="Gen-Silencing" title="Gen-Silencing"><i>(Gen-silencing)</i></a> seiner Expression kommt.<sup id="cite_ref-PMID18190688_4-0" class="reference"><a href="#cite_note-PMID18190688-4"><span class="cite-bracket">[</span>4<span class="cite-bracket">]</span></a></sup>

</p><p>Ein oft verwendeter <a href="Vektor_(Gentechnik)" title="Vektor (Gentechnik)">Vektor</a>, <i>pCAGGS</i>, der den CAG-Promotor enthält, wurde auf der Basis eines <a href="PUC19" title="PUC19"><i>pUC</i></a>-Vektors konstruiert.<sup id="cite_ref-PMID1660837_5-0" class="reference"><a href="#cite_note-PMID1660837-5"><span class="cite-bracket">[</span>5<span class="cite-bracket">]</span></a></sup> Er enthält zusätzlich das <a href="Polyadenylierungssignal" class="mw-redirect" title="Polyadenylierungssignal">Polyadenylierungssignal</a> des beta-Globin-Gens.

</p><p>Alternativ zum CAG-Promotor werden auch der <a href="CMV-Promotor" title="CMV-Promotor">CMV-Promotor</a> und der <a href="EF1%CE%B1-Promotor" title="EF1α-Promotor">EF1α-Promotor</a> verwendet.

</p>

<div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="Weblinks">Weblinks</h2></div>

<ul><li><a rel="nofollow" class="external text" href="http://www.addgene.org/vector-database/2042/">pCAGGS Vektor-Information bei <i>Addgene</i></a></li></ul>

<div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="Literatur">Literatur</h2></div>

<li id="cite_note-DOI10.1016/0378-1119(89)90209-6-1"><span class="mw-cite-backlink"><a href="#cite_ref-DOI10.1016/0378-1119(89)90209-6_1-0">↑</a></span> <span class="reference-text">Miyazaki Jun-ichi, Takaki Satoshi, Araki Kimi, Tashiro Fumi, Tominaga Akira, Takatsu Kiyoshi, Yamamura Ken-ichi: <i>Expression vector system based on the chicken β-actin promoter directs efficient production of interleukin-5.</i> In: <i>Gene.</i> 79, 1989, S. 269–277, <a href="Digital_Object_Identifier" title="Digital Object Identifier">doi</a>:<span class="uri-handle" style="white-space:nowrap"><a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1016/0378-1119%2889%2990209-6">10.1016/0378-1119(89)90209-6</a></span>.</span>

</li>

<li id="cite_note-PMID3185553-2"><span class="mw-cite-backlink"><a href="#cite_ref-PMID3185553_2-0">↑</a></span> <span class="reference-text">A. R. Buchman, P. Berg: <i>Comparison of intron-dependent and intron-independent gene expression.</i> In: <i>Molecular and cellular biology.</i> Band 8, Nummer 10, Oktober 1988, S. 4395–4405, <a class="external mw-magiclink-pmid" rel="nofollow" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/3185553?dopt=Abstract">PMID 3185553</a>, <a rel="nofollow" class="external text" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC365513/">PMC 365513</a> (freier Volltext).</span>

</li>

<li id="cite_note-PMID9175875-3"><span class="mw-cite-backlink"><a href="#cite_ref-PMID9175875_3-0">↑</a></span> <span class="reference-text">M. Okabe, M. Ikawa, K. Kominami, T. Nakanishi, Y. Nishimune: <i> 'Green mice' as a source of ubiquitous green cells.</i> In: <i>FEBS letters.</i> Band 407, Nummer 3, Mai 1997, S. 313–319, <a class="external mw-magiclink-pmid" rel="nofollow" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9175875?dopt=Abstract">PMID 9175875</a>.</span>

</li>

<li id="cite_note-PMID18190688-4"><span class="mw-cite-backlink"><a href="#cite_ref-PMID18190688_4-0">↑</a></span> <span class="reference-text">A. N. Alexopoulou, J. R. Couchman, J. R. Whiteford: <i>The CMV early enhancer/chicken beta actin (CAG) promoter can be used to drive transgene expression during the differentiation of murine embryonic stem cells into vascular progenitors.</i> In: <i>BMC cell biology.</i> Band 9, Januar 2008, S. 2, <a href="Digital_Object_Identifier" title="Digital Object Identifier">doi</a>:<span class="uri-handle" style="white-space:nowrap"><a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1186/1471-2121-9-2">10.1186/1471-2121-9-2</a></span>, <a class="external mw-magiclink-pmid" rel="nofollow" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18190688?dopt=Abstract">PMID 18190688</a>, <a rel="nofollow" class="external text" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2254385/">PMC 2254385</a> (freier Volltext).</span>

</li>

<li id="cite_note-PMID1660837-5"><span class="mw-cite-backlink"><a href="#cite_ref-PMID1660837_5-0">↑</a></span> <span class="reference-text">H. Niwa, K. Yamamura, J. Miyazaki: <i>Efficient selection for high-expression transfectants with a novel eukaryotic vector.</i> In: <i>Gene.</i> Band 108, Nummer 2, Dezember 1991, S. 193–199, <a class="external mw-magiclink-pmid" rel="nofollow" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/1660837?dopt=Abstract">PMID 1660837</a>.</span>

</li>

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